保健食品中异麦芽低聚糖、低聚果糖、大豆低聚糖的测定-代加工行业资讯

1.范围

本方法规定了保健食品中异麦芽低聚糖、低聚果糖、大豆低聚糖的测定方法。

本方法适用于保健食品（糖浆、糖粉、饮料、奶粉）中异麦芽低聚糖、低聚果糖、大豆低聚糖的测定。

本方法最低检出量：异麦芽糖2µg；潘糖5µg；异麦芽三糖10µg；蔗果三糖(GF₂)5µg ；蔗果四糖(GF₃)5µg ；蔗果五糖(GF₅)10µg ；棉籽糖20µg；水苏糖30µg。

2.原理

试样除去蛋白后，离心、脱色，用液相色谱分析，用NH₂柱分离，示差检测器测定，外标法定量。

3.试剂

除特殊说明，所用试剂均为分析纯。实验用水为去离子水或同等纯度的蒸馏水。

3.1 乙腈（色谱纯）。

3.2 无水乙醇。

3.3 麦芽糖、异麦芽糖、潘糖、麦芽三糖、异麦芽三糖、棉籽糖、水苏糖(含量≥98%) ，

3.4 低聚果糖（总含量³96%，其中GF₂38 %,GF₃ 51%, GF₄7%）。

3.5 麦芽糖、异麦芽糖混合标准溶液: 分别称取麦芽糖10.0mg, 异麦芽糖15.0mg, 潘糖9.0mg, 麦芽三糖15.0mg, 异麦芽三糖12.0mg，用水溶解，并定容至1.0mL。将此溶液逐级稀释成下列浓度：

标准溶液名称：麦芽糖、异麦芽糖、潘糖、麦芽三糖、异麦芽三糖（mg/mL）

　　1 0.50 0.75 0.45 0.75 0.60

　　2 1.00 1.50 0.90 1.50 1.20

　　3 2.00 3.00 1.80 3.00 2.40

　　4 10.00 15.00 9.00 15.00 12.00

3.6 低聚果糖标准溶液：精密称取含 GF₂38%、GF₃ 51%_、GF₄7%的低聚果糖标准品0.0500g,用水溶解并定容至2.50mL。将此液逐级稀释成下列浓度：

标准溶液名称： GF_2、 GF₃、 GF₄（mg/mL）

1 1.50 2.00 0.30

2 3.00 4.00 0.60

3 4.50 6.00 0.90

4 6.00 8.00 1.20

5 7.50 10.00 1.40

3.7 棉籽糖、水苏糖标准溶液：精密称取棉籽糖0.0400g，水苏糖0.0600g，用水溶解并定容至4.0mL。将此液逐级稀释成下列浓度：

标准溶液名称：棉籽糖水苏糖（mg/mL）

1 2.0 3.0

2 4.0 6.0

3 6.0 9.0

4 8.0 12.0

5 10.0 15.0

由于试样中程度不同的含有葡萄糖、果糖、蔗糖、乳糖，所以在配制标准应用液时可加入适量的葡萄糖、果糖、蔗糖、乳糖，主要是用于定性。

将各标准系列注入高效液相色谱仪进行测定，绘制标准工作曲线。

4.仪器

4.1 高效液相色谱仪（附带示差检测器）。

4.2 离心机： 10 000 r/min 。

4.3 分析天平：1/10 000。

4.4 分析天平：1/1 000。

5.分析步骤

5.1 试样制备

5.1.1 糖浆和糖粉：称取1.0000g 糖浆或0.2000g糖粉，用水稀释或溶解，并定容置10.0mL，摇匀，溶液过0.45mm滤膜，滤液用于HPLC测定。

5.1.2 不含乳液体饮料：饮料直接离心，上清液过0.45mm滤膜, 滤液用于HPLC测定。

5.1.3 含乳液体饮料: 取10.0mL试样放入烧杯中，加无水乙醇30mL，搅拌混匀，放置5min，离心，取上清液20 mL在沸水浴上挥发近干。残液用水溶解并定容至5-10 mL，溶液过0.45mm滤膜，滤液用于HPLC测定。

5.1.4 奶粉：称取 2.000g试样，放入200mL烧杯中，加水15.0mL溶解，再加45.0mL无水乙醇，搅匀，放置5min，离心，取上清液30.0mL在沸水浴上挥发近干，残液用水溶解并定容至一定体积，溶液过0.45mm滤膜，滤液用于HPLC测定。

5.2 高效液相色谱参考条件

5.1.1 色谱柱: 不锈钢柱，内径4.6mm×300mm反相氨基柱,粒径 5mm ;

5.1.2 柱温 45℃，检测室40℃。

5.1.3 流动相：乙腈+水=76+24

5.1.4 流量：1.5 mL/min。

5.1.5 灵敏度： 64。

5.1.6 进样量：20 mL

5.1.7 在上述色谱条件下注入标准溶液和试样溶液，以保留时间定性，外标法定量。

5.1.8

6.分析结果的表述

6.1 计算

A×C_i×V

X= ------------------
A_i ×m ×1 / 2

式中： X：试样中某低聚糖的含量, g/kg ( g/L)。

A：试样的峰面积或峰高。

C_i：单一低聚糖标准溶液的浓度, mg/mL 。

A_i：标准溶液的峰面积或峰高。

ｍ：试样质量, g（mL）。

V：试样定容体积，mL。

6.2 结果表示：结果保留两位有效数字。

注：功能性异麦芽低聚糖的含量以异麦芽糖、潘糖、异麦芽三糖计。

7.允许差

同一实验室，平行测定两次结果的相对偏差不得超过10%。

8.准确度

准确度以回收率表示。

将某种低聚糖加入糖浆、饮料或奶粉中，做回收率实验，回收率应在90%~104%范围内。

9.正相氨基色谱柱转换为反相氨基色谱柱的步骤以产品说明书为准。